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更新日期2023-08-26 15:21
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核殼色譜柱與全多孔色譜柱相比,所具有的高柱效以及高分析效率可以從Van Deemter方程來進行解釋。
核殼色譜柱的填料,一般是由內(nèi)部的實心球(其材質(zhì)以及形成方式與廠家有關(guān)、不同廠家,其技術(shù)存在不同)以及包裹在實心球上的多孔型硅膠或雜化顆粒型硅膠組成。
首先是核殼類色譜填料的內(nèi)核是實心球,導致該型填料具有更小的軸向擴散效應,體現(xiàn)在Van Deemter方程上,主要影響第二項參數(shù)Dm,使得色譜峰軸向擴展減小。
其次,由于實心球的存在,徑向上的溫度傳遞加快,使得溫度分布更加均一,加速傳質(zhì)速度;此外核殼類填料顆粒的傳質(zhì)路徑要比全多孔類填料短的多,使得傳質(zhì)速率與全多孔型填料相比更快。
最后也是最重要的,由于制備工藝的差異(核殼色譜柱填料的制備首先是制備實心球,之后在其表面“涂覆”全多孔硅膠;全多孔型色譜柱填料多是“一次性成型”),核殼色譜柱填料顆粒的粒徑分布相比全多孔色譜柱填料顆粒的粒徑分布更加均一、連續(xù)。體現(xiàn)在Van Deemter方程上,主要影響d一項參數(shù)dp,為渦流擴散項。
填料的粒徑分布越均一,渦流擴散項越小,對于理論塔板高度的貢獻也就越小,色譜柱的理論塔板數(shù)也就越多。渦流擴散項是色譜峰柱內(nèi)擴散的主要影響因素,模型圖3B比圖3A具有更加均一,連續(xù)的粒徑分布,因而具有更小的渦流擴散效應,具有更高的柱效,表現(xiàn)在色譜圖上就是其峰寬更小,相鄰色譜峰的分離度更大。
核殼色譜柱的使用和維護注意事項
核殼色譜柱的正確使用和維護十分重要,稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護核殼色譜柱。
?、俦苊鈮毫蜏囟鹊募眲∽兓叭魏螜C械震動。溫度的突然變化或者使核殼色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時應該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
?、趹饾u改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/p>
?、垡话阏f來核殼色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。
?、苓x擇使用適宜的流動相,以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一預柱,分析柱是鍵合硅膠時,預柱為硅膠,可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
?、荼苊鈱⒒|(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對樣品進行預處理或者在進樣器和核殼色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。
?、藿?jīng)常用強溶劑沖洗核殼色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進行清洗時,對流路系統(tǒng)中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml。
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